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    透析袋如何選擇與使用
    源葉生物 / 2019-08-28

     

    透析袋不知如何選擇?

    一、透析

    透析就是利用小分子能夠通過,而大分子不能夠通過半透膜的原理,將大小分子量物質分開的一種實驗手段;在膜兩側存在濃度差時,溶質從高濃度的一側(通常是樣品置于透析袋中)擴散通過半透膜到低濃度的一側(透析溶液一側)直至膜兩邊濃度達到平衡。如下圖所示:

    利用透析分離物質的優缺點:

    優點:樣品回收率高;操作簡單,無需繁瑣準備工作;成本低廉,可一次性使用;分離條件溫和;無需監控

    缺點:耗時較長(24-48小時);要求較為明顯的樣品和雜質之間的分子量差(1-2個數量級)。

    二、三種不同類型的透析袋

    1、普通型透析袋

    如:

    MD3534-5m

    普通型透析袋(3500

     

    34mm

    5/

    220.00

    現貨

    此類型透析袋可以耐受的pH范圍是5.0~9.0;可以接觸的溶劑見文章最后的表格

    此外還需要復雜的預處理:

    1)把透析袋剪成適當長度(10-20cm)的小段;

    2)在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘;

    3)用蒸餾水徹底清洗透析袋;

    4)放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘;

    5)冷卻后,存放于4度,必須確保透析袋始終浸沒在溶液內。從此時起取用透析袋是必須戴手套;

    6)用前在透析袋內裝滿水然后排出,將之清洗干凈;

    2. 再生纖維素透析袋:

    如:

    SP128118-1m

    再生纖維素透析袋(10000

     

    18mm,1.1ml/cm

    1/

    600.00

    現貨

    此類型透析袋可耐受pH范圍是2.0~12.0;耐受溫度是4~60℃;可以接觸的溶劑見文章最后的表格。不能煮,也不需要煮,只需用純水徹底沖洗即可。

    3.纖維素透析袋:

    如:

    SP131204-1m

    纖維素透析袋(5000

     

    31mm,3.1MLCM

    1/

    600.00

    現貨

    此類型透析袋可耐受pH范圍是2.0~9.0;耐受溫度是4~37℃;可以接觸的溶劑見文章最后的表格。不能煮,也不需要煮,只需用純水徹底沖洗即可。

    三、透析袋的選擇

    1. 確定透析袋的分子量

    SP128118-1m

    再生纖維素透析袋(10000

     

    18mm,1.1ml/cm

    1/

    600.00

    現貨

    以這款透析袋為例,括號中的10000就是這個貨號透析袋的截留分子量。此截留分子量的含義是:如果將分子量為10000的物質放入該透析袋中,90%以上會保留在透析袋中。

    在選擇適合截留分子量之前,首先要明確:欲保留在透析袋中的樣品和想要除去的雜質的分子量。

    這張圖橫坐標是樣品分子量,縱坐標是保留率,藍色,橙色和綠色分別代表了20kD,50kD100kD的透析袋。

    比如分子量10kD的樣品,如果選擇了20kD的透析袋,在圖中可以看出,它的保留率大概是83%,只透出去17%;如果選擇了50kD的透析袋,它的保留率大概是69%,只透出去31%;如果選擇了100kD的透析袋,它的保留率大概是28%,只透出去72%。

    試驗表明,如果想將雜質盡可能的都透出去,需要選擇的分子量至少是雜質分子量的100倍;比如雜質分子量是1kD,選擇100kD的透析袋最好,雜質會除去的很干凈;比如維生素B12(分子量1.3kD)和牛IgG蛋白(分子量150kD),如果選擇130kD分子量的透析袋,就可以將維生素B12除去的很干凈,同時對于牛IgG蛋白(分子量150kD)來說,也是90%以上的保留在透析袋中;但是兼顧實際,沒有130kD的透析袋,只有最接近的100kD的透析袋,所以就可以選擇100kD的透析袋,也可以達到很好的分離效果。

    但是,實驗人員想要分離開的兩個物質往往分子量差,達不到100倍,甚至只有10倍左右的差別。比如維生素B12(分子量1.3kD)和細胞色素C(分子量12kD),這個情況,如果再選擇100kD的透析袋,那么要保留的細胞色素C只有27%左右的保留率,損失太大;如果選擇20kD的透析袋,細胞色素C的保留率是88%左右,但是維生素B12會有12%的殘留在透析袋中;如果選擇50kD的透析袋, 細胞色素C的保留率只有76%左右,但是維生素B12只有2%殘留在透析袋中了。所以,在雜質和樣品的分子量相差不夠大時,考慮想除去雜質更多一些,即使樣品有些損失,還是想更多的保留樣品,即使雜質去除的不夠干凈也可以,綜合考慮,選擇合適的分子量。

    如果雜質和樣品分子量相差太小,比如雜質分子量1kD,樣品分子量只有2kD,這種情況,就不合適用透析袋分離了。

    2. 選擇普通型,再生型,or纖維素透析袋

    確定好分子量之后,根據實際情況,樣品溶劑等,選擇透析袋

    3. 正確選擇扁平寬度

    透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體積和透析容量。較小的透析管透析更快;較大的透析管因擴散距離較長透析較慢。為易于使用,建議使用總長(包括閉合夾和頂部空間)為大約10-15cm的透析袋。

    SP128118-1m

    再生纖維素透析袋(10000

     

    18mm,1.1ml/cm

    1/

    600.00

    現貨

    這款透析袋的扁平寬度是18mm,后面的1.1ml/cm 指的是每1cm長度的透析袋,可以裝1.1ml體積的樣品量。

    四、透析袋的使用

    下述透析程序是一個普遍的基礎透析過程。在開始透析之前應考慮到許多變數。透析樣品溶劑、膜的化學相容性、膜的截留分子量,透析溶劑、透析體積、溫度等變量都會影響透析速率,因此,一些應用中下述透析過程可能需要適當的變化

    a.   把適量的透析液(緩沖液)加入透析裝置。透析液的體積應為樣品體積量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的樣品)

    b.   裁剪適當長度的透析管。預留一段額外長度(約占總樣品體積量的20%)作為頭部空間

    c.   把透析管插入打開的透析夾,在約超出透析夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋

    d.   由透析管開口端將樣品裝入。調整一下頂部空間的長度,夾緊透析夾

    e.   把透析樣品放在合適的透析緩沖液中

    f.    透析要根據具體的應用需求。通常情況下,允許過夜透析。在持續透析的過程中,至少要進行3次全部更換透析液。建議在(透析后)2-4小時,6-8小時和10-14小時(第2天早晨)更換透析液。在最后一次透析液的更換后要至少繼續進行2小時的透析。

    五、使用注意事項

    a. 透析袋不能在純水中長期儲存,會長菌,用0.05%疊氮化鈉溶液儲存

    b. 樣品按推薦的單位長度容量加樣,不可多加,樣品濃度不可太大,否則容易導致膜漲破

    c. 樣品和透析液體積比一般是1:50~500

    d. 對于高濃度污染物,樣品可能需要較長的時間透析,透析液需要更頻繁的更換。

    e. 透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。纖維素透析袋可以承受的溫度高達37℃,再生纖維素透析袋可以承受的溫度高達60℃。

    六、使用注意事項

    在適當的儲存情條件下,保質期為兩年。干燥的透析袋要在室溫或4℃儲存在聚乙烯袋中。一旦變濕,透析袋應浸泡在下列之一的溶液中:0.05%疊氮化鈉,1%苯甲酸鈉或1%甲醛。(備注:一旦變潮濕,不要讓透析袋干燥。不斷干燥會造成孔隙結構不可恢復的倒塌)

     

    更多透析袋查詢,請登錄源葉官網:http://shyuanye.com/

    為更加方便客戶了解和查詢透析袋信息,源葉生物專門印刷了透析袋目錄冊,如有需要,可以和相關業務員咨詢!

     

     

     

    1-5 膜材料的耐酸堿性和有機抗性

    R:推薦; L:有限接觸;NR:不推薦

     

    纖維素透析袋(CE

    再生纖維素透析袋(RC

    醋酸(5%

    L

    R

    醋酸25%

    NR

    R

    醋酸(冰醋酸)

    NR

    R

    丙酮

    NR

    R

    乙腈

    NR

    R

    氫氧化銨(稀釋)

    NR

    R

    氫氧化銨(中濃度)

    NR

    L

    醋酸戊酯

    NR

    R

    戊醇

    L

    R

    苯胺

    NR

    R

    NR

    R

    芐醇

    NR

    R

    硼酸

    R

    R

    鹽水

    R

    R

    三溴甲烷

    NR

    R

    醋酸丁酯

    NR

    R

    丁醇

    L

    R

    乙二醇丁醚

    NR

    L

    丁醛

    NR

    R

    四氯化碳

    NR

    R

    熔纖劑

    NR

    L

    氯乙酸

    NR

    R

    三氯甲烷

    L

    R

    鉻酸

    NR

    NR

    甲酚

    NR

    R

    環己烷

    L

    R

    環己酮

    NR

    R

    雙丙酮醇

    NR

    R

    二氯甲烷

    L

    R

    二甲基甲酰胺

    NR

    L

    二甲亞砜

    NR

    R

    1,4-二氧雜環己烷

    NR

    L

    乙醚

    NR

    R

    醋酸乙酯

    NR

    R

    乙醇

    L

    R

    乙醇(15%

    R

    R

    乙醇(95%

    L

    R

    二氯化乙烯

    NR

    R

    乙二醇

    L

    R

    環氧乙烷

    NR

    L

    甲醛(2%

    L

    R

    甲醛(30%

    L

    R

    甲酸(25%

    NR

    R

    甲酸(50%

    NR

    R

    Freon

    R

    R

    汽油

    R

    R

    丙三醇

    R

    R

    甘油

    R

    R

    己烷

    R

    R

    己醇

    L

    R

    鹽酸(5%

    R

    R

    鹽酸(25%

    NR

    NR

    鹽酸(37%

    NR

    NR

    過氧化氫(30%

    R

    R

    碘溶液

    NR

    NR

    異丁醇

    R

    R

    異丙醇

    L

    R

    乙酸異丙酯

    NR

    R

    異丙醚

    L

    R

    噴氣燃料640A

    R

    R

    煤油

    R

    R

    乳酸

    R

    R

    乙酸甲酯

    NR

    R

    甲醇

    L

    R

    甲醇(98%

    L

    R

    乙二醇甲醚

    L

    L

    氯甲烷

    NR

    R

    甲乙酮

    NR

    R

    甲酸甲酯

    NR

    L

    甲基異丁基甲酮

    NR

    R

    二氯甲烷

    L

    R

    N-甲基-2-吡咯烷酮

    NR

    R

    礦物精

    R

    R

    一氯苯

    L

    R

    硝酸(5%

    L

    R

    硝酸(25%

    NR

    NR

    硝酸(6N

    NR

    NR

    硝酸(70%

    NR

    NR

    硝酸(濃縮)

    NR

    NR

    硝基苯

    NR

    L

    硝基丙烷

    NR

    L

    油類,礦物質

    R

    R

    戊烷

    R

    R

    高氯酸(25%

    NR

    L

    全氯乙烯

    NR

    R

    石油制品

    R

    R

    石油醚

    R

    R

    苯酚(0.5%

    R

    R

    苯酚(10%

    NR

    R

    磷酸(25%

    NR

    L

    氫氧化鉀(1N

    L

    L

    氫氧化鉀(25%

    NR

    R

    氫氧化鉀(50%

    NR

    NR

    氫氧化鉀(濃縮)

    NR

    NR

    次氯酸鈉

    NR

    NR

    硫酸(5%

    L

    R

    硫酸(25%

    NR

    L

    硫酸(6N

    NR

    L

    硫酸(濃縮)

    NR

    NR

    四氫呋喃

    NR

    R

    甲苯

    R

    R

    三氯乙酸(25%

    NR

    NR

    三氯苯

    NR

    R

    三氯乙烷

    L

    R

    三氯乙烯

    R

    R

    三乙胺

    NR

    R

    松節油

    NR

    R

    尿素

    R

    R

    尿素(6N

    NR

    R

    R

    R

    二甲苯

    NR

    R

     

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